Elektroforézis mi ez, mire való és hogyan készül
Az elektroforézis laboratóriumi technika, amelynek célja a molekulák méretük és elektromos töltésük szerinti elválasztása a betegségek diagnosztizálására, a fehérje expressziójának igazolására vagy a mikroorganizmusok azonosítására..
Az elektroforézis egy egyszerű és olcsó eljárás, amelyet laboratóriumi rutinokban és kutatási projektekben használnak. Az elektroforézis célja szerint a diagnózis eléréséhez szükség lehet más vizsgálatok és vizsgák elvégzésére..
Mire szolgál?
Az elektroforézis különféle célokra is elvégezhető, mind kutatási projektekben, mind diagnózisban, mivel ez egyszerű és olcsó technika. Így az elektroforézis elvégezhető:
- Azonosítsa a vírusokat, gombákat, baktériumokat és parazitákat, ez az alkalmazás gyakoribb a kutatási projektekben;
- Apasági teszt;
- Ellenőrizze a fehérjék expresszióját;
- A mutációk azonosítása, amelyek hasznosak lehetnek például a leukémia diagnosztizálásában;
- Elemezze a keringő hemoglobin típusát, amely hasznos lehet a sarlósejtes vérszegénység diagnosztizálásában;
- Becsülje meg a vérben levő fehérjék mennyiségét.
Az elektroforézis célja szerint szükség lehet további kiegészítő vizsgálatok elvégzésére az orvos számára a diagnózis befejezéséhez.
Hogyan történik?
Az elektroforézis elvégzéséhez szükséges a gél, amely a célkitűzéstől függően lehet poliakril-amidból vagy agarózból, elektroforézis pufferből és tartályból, molekulatömeg-jelölőből és fluoreszcens festékből, valamint egy UV vagy LED-es fényszóró berendezésen, más néven transzluminátorként..
A gél elkészítése után egy speciális tárgyat el kell helyezni úgy, hogy a lyukak a gélben legyenek, közismert nevén a fésű, és hagyják, hogy a gél beálljon. Amikor a gél kész, csak az anyagokat vigye fel a kutakba. Ehhez molekuláris tömegjelölőt kell az egyik üregbe helyezni, egy pozitív kontrollt, azaz az anyagot, ami ismert, mi ez, egy negatív kontrollt, amely garantálja a reakció érvényességét, és az analizálandó mintákat. Az összes mintát fluoreszcens festékkel kell keverni, mivel így meg lehet jeleníteni a sávokat az átvilágítón.
A mintákat tartalmazó gélt az elektroforézis kádba kell helyezni, amely tartalmazza a specifikus pufferoldatot, majd bekapcsolja az eszközt úgy, hogy áram legyen, és ennek következtében a potenciálkülönbség, ami fontos az elválasztáshoz részecskék terhelésük és méretük szerint. Az elektroforetikus futási idő az eljárás céljától függ, és akár 1 órát is igénybe vehet.
A meghatározott idő elteltével meg lehet tekinteni az elektroforézis eredményét az átvilágítón keresztül. Ha a gélt UV vagy LED fény alatt helyezzük el, akkor láthatóvá válik a sávmintázat: minél nagyobb a molekula, annál kisebb a vándorlása, közelebb kerül a kúthoz, míg minél könnyebb a molekula, annál nagyobb a vándorlási potenciál..
A reakció validálásához szükséges, hogy a pozitív kontroll sávjai megjelenjenek, és a negatív kontrollokban semmit sem jelenjenek meg, mert egyébként azt jelzi, hogy szennyeződés történt, és az egész folyamatot meg kell ismételni.
Az elektroforézis típusai
Az elektroforézist különféle célokra lehet elvégezni, és céljának megfelelően többféle gél alkalmazható, amelyek közül a leggyakoribb a poliakrilamid és az agaróz..
A mikroorganizmusok azonosítására szolgáló elektroforézist inkább kutatási laboratóriumokban végzik, azonban diagnosztikai célokra az elektroforézis felhasználható olyan hematológiai betegségek és betegségek azonosítására, amelyek a fehérjék mennyiségének növekedésével alakulnak ki, mivel ezek az elektroforézis fő típusai. :
1. Hemoglobin elektroforézis
A hemoglobin-elektroforézis laboratóriumi technika, melynek célja a vérben keringő különböző hemoglobin-típusok azonosítása, lehetővé téve a hemoglobin-szintézissel kapcsolatos betegségek jelenlétének azonosítását. A hemoglobin típusát elektroforézissel lehet azonosítani egy adott pH-n, ideális esetben 8,0 és 9,0 között, ellenőrizve a sávok mintázatát, amely összehasonlítható a normál mintával, lehetővé téve a rendellenes hemoglobinok jelenlétét..
Mire készül: A hemoglobin-elektroforézist a hemoglobinszintézissel összefüggő betegségek, például sarlósejtes vérszegénység és hemoglobin C-betegség, valamint a talassémia megkülönböztetésénél hasznos vizsgálata és diagnosztizálása céljából végezzük. Tanulja meg, hogyan kell értelmezni a hemoglobin elektroforézist.
2. Fehérje elektroforézis
A fehérje elektroforézis az orvos által igényelt vizsgálat, amely felméri a vérben keringő fehérjék mennyiségét, és ezáltal azonosítja a betegségeket. Ezt a tesztet vérmintából végezzük, amelyet centrifugálunk, hogy megkapjuk a plazmát, amely a vér azon része, amely többek között a fehérjékből áll.
Az elektroforézis után meg lehet jeleníteni a sávok mintáját, majd egy grafikont, amelyben feltüntetik a fehérjék egyes frakcióinak mennyiségét, amelyek alapvető fontosságúak a diagnózishoz.
Mire készül: A fehérje elektroforézis lehetővé teszi az orvos számára, hogy a sávmintázat és a vizsgálati jelentésben bemutatott ábra alapján megvizsgálja a multiplex mieloma, dehidráció, cirrhosis, gyulladás, májbetegség, hasnyálmirigy-gyulladás, lupus és magas vérnyomás előfordulását..
Tudja meg, hogyan történik ez, és hogyan kell megérteni a fehérje elektroforézis eredményét.
